La greffe musculaire comme stratégie chirurgicale pour rétablir le flux sanguin vers le cerveau de la souris après un AVC

Résumé

Source : Paro, M. R., et.al. Un modèle de traitement de l’encéphalomyosynangiose après un accident vasculaire cérébral induit par l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne chez la souris. J. Vis. Exp. (2022).

Cette vidéo montre une intervention chirurgicale visant à greffer un muscle vascularisé à la surface du cerveau à la suite d’une occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne. La greffe favorise la formation de nouveaux vaisseaux sanguins dans la région ischémique, améliorant ainsi l’apport en oxygène et en nutriments. Au fil du temps, le muscle intégré soutient la survie neuronale et aide à la récupération après un AVC.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Chirurgie de l’encéphalomyosynangiose (EMS)
   1. Après 60 min d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCAo), répartissez aléatoirement les souris dans les groupes MCAo-only ou MCAo + EMS. Effectuez une EMS 4 h après MCAo (groupe MCAo + EMS) ou une chirurgie simulée pour certaines expériences (groupe EMS uniquement). Enfilez une nouvelle paire de gants chirurgicaux stériles avant la chirurgie.
      REMARQUE : Les souris se sont remises de l’anesthésie après 60 minutes de MCAo et ont été réanesthésiées avant la chirurgie EMS.
   2. Pour les groupes qui reçoivent un EMS (MCAo + EMS ou groupes EMS uniquement), faites une incision cutanée de 10 à 15 mm avec des ciseaux, allant de 1 à 2 mm rostral à l’oreille droite à 1 à 2 mm de caudale à l’œil droit.
      REMARQUE : Des ciseaux stériles ont été utilisés pour éviter des dommages accidentels aux muscles temporaux situés en dessous.
   3. Rétractez les lambeaux cutanés à l’aide de pinces et identifiez visuellement le muscle temporal et le crâne.
   4. Disséquez brutalement le muscle temporal loin du crâne à l’aide de ciseaux avec une technique d’étalement. Effectuez une myotomie de 2 à 3 mm dirigée ventralement le long du bord caudal du muscle pour faciliter la réflexion ventrale.
   5. Effectuez une craniotomie de ~5 mm de diamètre au niveau du crâne sous le muscle temporal réfléchi à l’aide d’une micro-perceuse.
   6. Retirez la dure-mère à l’aide d’une pince à épiler pour exposer la surface piale du cerveau. Soyez extrêmement prudent pour éviter de vous blesser accidentellement au cerveau.
   7. Suturez le bord dorsal du muscle temporal au tissu sous-cutané du lambeau cutané dorsal avec 6-0 filaments monocryl, en le faisant affleurer le cortex cérébral exposé.
   8. Fermez l’incision cutanée avec une suture monofilament 6-0. Remettez la souris dans sa cage et surveillez jusqu’à ce qu’elle se remette de l’anesthésie. Remettez la souris dans son logement.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
6-0 monocryl suture	Ethilon	697G
70 % éthanol pour assainir surface de fonctionnement Walgreen
Bupivacaïne 0.25 % solution	Midwest Vet
Pinces pour la rétraction tissulaire	Roboz
Doccal suture avec revêtement en nylon	Doccal corporation Sharon MA	602145PK10Re
Coussin chauffant électrique pour surface
Isoflurane anesthésie	Piramal Critical Care Inc
Appareil d’administration d’isoflurane	-- B6Surgivet (Isotech 4)
Micro perceuse	Harvard Appareil Pince
à épiler de microdissection, courbe x2	Piramal Critical Care Inc
Angiogenèse de souris panneau arrat	R& D biotech	ARY015
Tournevis à aiguille	Ethilon
Fonctionnement microscope	Olympus
Surface opératoire	Olympus
Ciseaux chirurgicaux	Roboz

d’opération